在核酸脂质纳米粒的合成过程中，正电荷和负电荷的比例，也就是N/P比，对于纳米粒子的稳定性和电荷性能非常关键。通常情况下，正电荷来自于带有可电离的铵根的阳离子脂质，而负电荷则来自于富含磷酸根的核酸分子。这两者通过静电吸附方式结合在一起。然而，不合理的N/P比可能导致一系列问题，包括粒子过大和稳定性下降等缺陷。因此，准确计算和调整N/P比非常关键。

•  阳离子脂质浓度（即N的浓度）：6.25 mmol/L

• 有机相体积（含阳离子脂质）：1 mL

• 核酸浓度：0.17 mg/mL

• 水相体积（含核酸）：3 mL

•  核苷酸的平均分子量：330Dal，即摩尔质量330 g/mol

  
  

其中核苷酸的平均分子量为经验的平均值，如果使用的核酸序列已知，则能够计算得到精确的平均分子量。

在以上条件下，N的物质的量为：

C_{阳离子脂质}x V = 6.25 mmol/L x 1 ml

                      = 6.25 x 10^-6 mol

C_{阳离子脂质}  ：阳离子脂质浓度

而P的物质的量为：

（C_核酸 x V_水相 ）/M_{核苷酸平均}=（0.17 mg/mL x 3 ml）/（330g/molx 1000）

                          =1.545x10^-6 mol

因此N/P比为：

（6.25 x 10-6 mol）/（1.545x10^-6 mol）≈4：1

在实际应用中，您可以首先设定所需的N/P比，然后根据这个比例来确定有机相或水相的浓度。这种逆向计算方法非常有效。例如，如果您将N/P比设定为6:1，并且其他浓度保持不变，那么核酸的浓度需要降低到原来的2/3，即0.113 mg/mL。这种方法可以帮助您根据需要的比例来调整浓度，以满足您的实验要求，而不需要重新计算整个公式。

在计算中，并没有考虑核酸的具体长度，因为核酸长度通常不会对所需的质量浓度产生影响。以单链RNA和上方计算得到的数值为例，在保持N/P比和N的物质量不变的情况下，所需的P物质的量也固定为1.545×10^-6 mol。核酸的质量浓度与所需的P物质的量之间存在如下关系。

C_核酸=M_核酸/V =(N_核酸 x M_核酸）/ V

n_核酸为核酸的物质的量（摩尔数），M_核酸为核酸的摩尔质量对于1000 nt的mRNA，一个mRNA分子就有1000个阴离子；而对于2000 nt的mRNA来说，一个mRNA分子则有2000个阴离子，所需的物质的量（摩尔数）只需1000 nt的一半，但相对应的，其核酸的摩尔质量则会提升一倍（不考虑不同核苷酸的质量差异）。所以两者相乘，最终的数值并没有变化。因此，在使用mRNA的时候，换算成质量浓度对于计算更为方便。

铭汰医药设备专注于纳米药物制备及递送技术，提供一站式整体解决方案。通过微流控芯片技术Microflow实现RNA药物递送、纳米颗粒包裹。可包裹材料有：化药、mRNA、siRNA、DNA等有效物质，实现该物质的高效递送，从低通量至高通量均可覆盖，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。目前，铭汰已服务国内多家知名药企并具备成功申报临床的案例。